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液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有、快速、靈敏等特點。本文章主要講解液相色譜儀的操作過程。下面就跟小編一起來看看看看吧！

　　1、開機設(shè)定參數(shù)(檢測波長、流速)，更換所需流動相，檢查色譜柱是否正確。

　　2、排液置換管路中流動相，沖洗進樣閥，洗好進樣針。

　　3、沖洗色譜柱進行平衡，其間可提前進行樣品的處理，樣品信息的注冊。

　　4、平衡好以后進空白試驗，排除系統(tǒng)污染。

　　5、柱子穩(wěn)定好以后進樣，等待運行結(jié)束(其間清洗進樣針)，積分計算，出具報告。

　　詳細操作步驟如下：

　　1、 開機操作：

　　(1)、打開電源，用Harb相連接時，注意Harb電源，打開計算機，打開Bootp Server(一般啟動時已打開);

　　(2)、自上而下打開個組件電源，Bootp Server里顯示有信號時(有六行字符)，打開工作站(先打開On line);

　　(3)、打開沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開關(guān)(需用針捅抽)，控制流量大小，以能流出的小流量為準;

　　(4)、注意各流動相所剩溶液的容積設(shè)定，若設(shè)定的容積低于低限會自動停泵，注意洗泵溶液的體積，及時加液;

　　(5)、使用過程中要經(jīng)常觀察儀器工作狀態(tài)，及時正確處理各種突發(fā)事件。

　　2、 先以所用流動相沖洗系統(tǒng)一定時間(如所用流動相為含鹽流動相，必須先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相)，正式進樣分析前30min 左右開啟D燈或W燈，以延長燈的使用壽命;

　　3、 建立色譜操作方法，注意保存為自己命名的Method，勿覆蓋或刪除他人的方法及實驗結(jié)果;

　　4、 使用手動進樣器進樣時，在進樣前和進樣后都需用洗針液洗凈進樣針筒，洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑，進樣前必須用樣品液清洗進樣針筒3遍以上，并排除針筒中的氣泡;

　　5、 溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎，在更換流動相時注意保護，當發(fā)現(xiàn)過濾頭變臟或長菌時，不可用超聲洗滌，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌;

　　6、 實驗結(jié)束后，一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鐘以上，再用甲醇沖洗。沖洗過程中關(guān)閉D燈、W燈;

　　7、 關(guān)機時，先關(guān)閉泵、檢測器等，再關(guān)閉工作站，然后關(guān)機，后自下而上關(guān)閉色譜儀各組件，關(guān)閉洗泵溶液的開關(guān);

　　8、 使用者須認真履行儀器使用登記制度，不要擅自拆卸儀器。

　　流動相：

　　1、 流動相應(yīng)選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水，酸堿液及緩沖液需經(jīng)過濾后使用，過濾時注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍;

　　2、 水相流動相需經(jīng)常更換(一般不超過2天)，防止長菌變質(zhì);

　　3、 使用雙泵時，A、B、C、D四相中，若所用流動相中有含鹽流動相，則A、D(進液口位于混合器下方)放置含鹽流動相，B、C(進液口位于混合器上方)放置不含鹽流動相;

　　A、B、C、D四個儲液器中其中一個為棕色瓶，用于存放水相流動相。

　　樣品：

　　1、 采用過濾或離心方法處理樣品，確保樣品中不含固體顆粒;

　　2、 用流動相或比流動相弱(若為反相柱，則極性比流動相大;若為正相柱，則極性比流動相小)的溶劑制備樣品溶液，盡量用流動相制備樣品液;

　　手動進樣時，進樣量盡量小，使用定量管定量時，進樣體積應(yīng)為定量管的3～5倍;

　　色譜柱：

　　1、 使用前仔細閱讀色譜柱附帶的說明書，注意適用范圍，如pH值范圍、流動相類型等;

　　2、 使用符合要求的流動相;

　　3、 使用保護柱;

　　4、 如所用流動相為含鹽流動相，反相色譜柱使用后，先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液)，再用甲醇沖洗。

　　5、 色譜柱在不使用時，應(yīng)用甲醇沖洗，取下后緊密封閉兩端保存;

　　6、 不要高壓沖洗柱子;

　　7、 不要在高溫下長時間使用硅膠鍵合相色譜柱;